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唾液酸测定试剂盒(比色法)图片
产品货号:
SNM163
中文名称:
唾液酸测定试剂盒(比色法)
英文名称:
Sialic acid assay kit
产品规格:
50管/48样
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒可检测动物血清(浆)、组织等样本中SA含量。

唾液酸是神经氨酸,广泛存在动物组织及微生物中,是细胞膜糖蛋白和糖脂的重要成份,位于细胞膜糖蛋白及糖脂末端,参与细胞表面多种生理功能。恶性肿瘤表面糖蛋白和糖脂的结构及含量发生明显变化,可使多量的SA从癌细胞表面脱落进入血液,使血清SA升高.其含量的测定对某些先天性代谢障碍及Behcet综合症的研究具有重要意义。SA升高也是心血管疾病的危险因素之一。

测定原理:
唾液酸(SA)在氧化剂存在的情况下与5-甲基苯二酚形成紫红色络合物,吸光度符合比色定律,通过测定络合物吸光度与标准即可计算出唾液酸的含量。

产品特点:

  • 稳定性好:试剂盒2~8℃存放3个月有效。
  • 再现性好:变异系数CV=1.5%。
  • 回收试验:X =103%。
  • 受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
  • 测试面广:可测各种动物血清(浆)、组织、微生物,效果均佳。


所需仪器:

  • 分光光度计(560nm)
  • 100℃水浴锅
  • 低俗离心机
  • 漩涡混匀器
  • 微量移液器


产品组成:
组分规格保存
试剂一20mL室温保存6个月
试剂二(显色剂)4×60mL4℃避光保存6个月
1mmol/L SA标准品0.5mL≤-20℃保存6个月


操作流程:

  • 按步骤加入样本和R1、R2。
  • 漩涡混匀,100℃孵育15分钟。
  • 3500r/min离心10min。
  • 560nm波长,1cm光径,比色。


操作步骤:

一、血清(浆)中SA的测定

  • 按下表加入相应成分:
    成分空白管标准管测定管
    ddH2O100μL--
    1mmol/L SA标准品-100μL-
    血清(浆)--100μL
    试剂一200μL200μL200μL
    试剂二4mL4mL4mL

    混匀,100℃水浴(或者开盖煮沸)15分钟,流水冷却后,3000~3500转/分,离心10分钟,取上清,波长560nm,光径1cm,双蒸水调零,测定各管吸光值。
  • 血清(浆)中SA的计算:

    血清(浆)中SA含量测定OD值-空白OD值×标准品浓度
    (mmol/L)标准OD值-空白OD值(1mmol/L)


    血清(浆)中SA含量测定OD值-空白OD值×标准品浓度×分子量
    (mg/L)标准OD值-空白OD值(1mmol/L)(309.3)

  • 计算举例:
    取血清0.1mL按操作步骤进行SA测定,测得测定管吸光度为0.184,标准管吸光度为0.107,空白管吸光度为0.007。则计算结果为:

    血清中SA含量0.184-0.007×1=1.77mmoL/L
    (mmol/L)0.107-0.007


    血清中SA含量0.184-0.007×1×309.3=547.46mg/L
    (mg/L)0.107-0.007


二、组织中SA的测定

  • 样本处理:
    准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=1:9的比例,加入生理盐水,冰水浴条件下机械匀浆,2500转/分,离心10分钟,取上清0.2mL待测(同时取样进行蛋白浓度测定)。
  • 按下表加入相应成分:
    成分空白管标准管测定管
    ddH2O200μL100μL-
    1mmol/L SA标准品-100μL-
    组织匀浆上清液--200μL
    试剂一200μL200μL200μL
    试剂二4mL4mL4mL

    混匀,100℃水浴(或者开盖煮沸)15分钟,流水冷却后,3000~3500转/分,离心10分钟,取上清,波长560nm,光径1cm,双蒸水调零,测定各管吸光值。
  • 组织中SA的计算:

    组织中SA含量测定OD值-空白OD值×标准品浓度÷样本蛋白浓度
    (mmol/gprot)标准OD值-空白OD值(0.5mmol/L)(gprot/L)


    组织中SA含量测定OD值-空白OD值×标准品浓度÷样本蛋白浓度×分子量
    (mg/gprot)标准OD值-空白OD值(0.5mmol/L)(gprot/L)(309.3)

  • 计算举例:
    取10%大鼠肝匀浆上清0.2mL按步骤进行测定,测得空白管OD值为0.006,测定管OD值为0.063,标准管OD值为0.108,同时测得10%肝匀浆上清蛋白为8.5mgprot/mL(即8.5gprot/L)。则计算结果为:

    组织中SA含量0.063-0.006×0.5÷8.5=0.033mmol/gprot
    (mmol/gprot)0.108-0.006


    组织中SA含量0.063-0.006×0.5÷8.5×309.3=10.2mg/gprot
    (mg/gprot)0.108-0.006

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