产品货号:
SNM159
中文名称:
组织中的铁含量测定试剂盒(比色法)
英文名称:
tissue iron assay kit
产品规格:
50管/48样
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒可测各种动物组织、植物组织等样本中铁的含量。
在酸性溶液和还原剂的作用下,使运铁蛋白中铁与蛋白分离,使组织中的高铁还原成亚铁,后者与双吡啶结合成粉红色的络合物,在一定范围内,铁离子的多少与呈色深浅成正比关系。
铁有70%左右存在于血红蛋白中,是血红蛋白和肌红蛋白的重要原料,铁进入血浆后以转铁蛋白形式向细胞内运输铁,而且将具有毒性作用的游离铁转变为对细胞无害的结合铁。
保存:4℃,有效期3个月。
相关搜索:组织中的铁含量测定试剂盒(比色法),组织铁,tissue iron assay kit
在酸性溶液和还原剂的作用下,使运铁蛋白中铁与蛋白分离,使组织中的高铁还原成亚铁,后者与双吡啶结合成粉红色的络合物,在一定范围内,铁离子的多少与呈色深浅成正比关系。
铁有70%左右存在于血红蛋白中,是血红蛋白和肌红蛋白的重要原料,铁进入血浆后以转铁蛋白形式向细胞内运输铁,而且将具有毒性作用的游离铁转变为对细胞无害的结合铁。
- 快速简便:全程约2小时,可测50例左右样本。
- 稳定性好:试剂盒4℃保存3个月。
- 再现性好:变异系数CV=1.5%。
- 回收试验:X =100%。
- 受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
- 测试面广:可测各种动物血清(浆)、组织,效果均佳。
组分 | 规格 | |
铁显色剂 | 2号甲粉 | 1支 |
2号乙粉 | 1支 | |
2号丙液 | 100mL | |
100mg/L铁标准贮备液 | 1mL |
保存:4℃,有效期3个月。
- 铁显色剂的配制:
使用时将2号甲粉、2号乙粉倒入l00mL 2号丙液中,充分混匀,溶解完全,即为铁显色剂,4℃避光保存。 - 2mg/L铁标准应用液的配制:
取铁标准贮备液0.2mL加双蒸水定溶至10mL,4℃保存。
- 玻璃器材需严格清洗,避免铁的污染,建议最好用一次性塑料试管。
- 若上清浑浊,可再用另一试管再次离心后比色。
- 本法测定效果好,干扰因素少,适用于多种组织匀浆的测定。
- 样本前处理:
- 动物组织的样本前处理:准确称取待测动物组织的重量,按重量(g):体积(ml)=l:9的比例,加入9倍体积的生理盐水,冰水浴条件机械匀浆,2500转/分,离心10分钟,取上清液待测。
- 植物组织的样本前处理:准确称取待测植物组织的重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例,加入9倍体积的匀浆介质(匀浆介质推荐使用0.1mol/L pH7~7.4磷酸盐缓冲液),冰水浴条件下机械匀浆,3500转/分,离心10分钟,取上清液待测。
- 动物组织的样本前处理:准确称取待测动物组织的重量,按重量(g):体积(ml)=l:9的比例,加入9倍体积的生理盐水,冰水浴条件机械匀浆,2500转/分,离心10分钟,取上清液待测。
- 操作表:
空白管 标准管 测定管 双蒸水(ml) 0.5 2mg/L铁标准应用液(ml) 0.5 待测样本(ml) 0.5 铁显色剂(ml) 1.5 1.5 1.5 混匀后,沸水浴5分钟,流水冷却,3500转/分钟,离心10分钟,取上清液1.0mL,0.5cm光径,波长520nm,双蒸水调零,测各管吸光度0D值。
- 计算公式:
组织铁含量
(mg/gprot)= 测定OD值-空白OD值 × 标准品浓度
(2mg/L)÷ 待测样本蛋白浓度
(gprot/L)标准OD值-空白OD值 组织铁含量
(μmol/gprot)= 测定OD值-空白OD值 × 标准品浓度
(35.81μmol/L)÷ 待测样本蛋白浓度
(gprot/L)标准OD值-空白OD值
注:标准管铁含量为2000μg/L,铁原子量为55.847,所以标准管铁含量为35.81μmol/L - 计算举例:
例1:取10%的小鼠肝脏组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定,在520nm处,0.5cm光径,测得各管吸光度为:空白管0.002,标准管0.064,测定管0.235,同时测得10%小鼠肝匀浆蛋白浓度为13.1365gprot/L,则计算如下:组织铁含量
(μmol/gprot)= 测定OD值-空白OD值 × 标准品浓度
(35.81μmol/L)÷ 待测样本蛋白浓度
(gprot/L)标准OD值-空白OD值 = 0.235-0.002 ×35.81÷13.1365=10.3324(μmol/gprot) 0.064-0.002
例2:取10%的小鼠肾组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定,在520nm处,0.5cm光径,测得各管吸光度为:空白管0.002,标准管0.064,测定管0.079,同时测得10%小鼠肾匀浆蛋白浓度为10.5776gprot/L,则计算如下:组织铁含量
(μmol/gprot)= 测定OD值-空白OD值 × 标准品浓度
(35.81μmol/L)÷ 待测样本蛋白浓度
(gprot/L)标准OD值-空白OD值 = 0.079-0.002 ×35.81÷10.5776=4.2045(μmol/gprot) 0.064-0.002
例3:取10%的小鼠心肌组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定,在520nm处,0.5cm光径,测得各管吸光度为:空白管0.002,标准管0.064,测定管0.078,同时测得10%小鼠心肌匀浆蛋白浓度为6.6536gprot/L,则计算如下:组织铁含量
(μmol/gprot)= 测定OD值-空白OD值 × 标准品浓度
(35.81μmol/L)÷ 待测样本蛋白浓度
(gprot/L)标准OD值-空白OD值 = 0.078-0.002 ×35.81÷6.6536=6.5974(μmol/gprot) 0.064-0.002
例4:取10%的小鼠肺组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定,在520nm处,0.5cm光径,测得各管吸光度为:空白管0.002,标准管0.064,测定管0.094,同时测得10%小鼠肺匀浆蛋白浓度为7.1655gprot/L,则计算如下:组织铁含量
(μmol/gprot)= 测定OD值-空白OD值 × 标准品浓度
(35.81μmol/L)÷ 待测样本蛋白浓度
(gprot/L)标准OD值-空白OD值 = 0.094-0.002 ×35.81÷7.1655=7.4157(μmol/gprot) 0.064-0.002
例5:取10%的小鼠脑组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定,在520nm处,0.5cm光径,测得各管吸光度为:空白管0.002,标准管0.064,测定管0.040,同时测得10%小鼠脑匀浆蛋白浓度为4.4358gprot/L,则计算如下:组织铁含量
(μmol/gprot)= 测定OD值-空白OD值 × 标准品浓度
(35.81μmol/L)÷ 待测样本蛋白浓度
(gprot/L)标准OD值-空白OD值 = 0.040-0.002 ×35.81÷4.4358=4.9479(μmol/gprot) 0.064-0.002
例6:取5%的菠菜叶片组织匀浆0.5mL按操作表进行组织铁测定,在520nm处,0.5cm光径,测得各管吸光度为:空白管0.002,标准管0.064,测定管0.053,同时测得5%菠菜叶片匀浆蛋白浓度为1.6378gprot/L,则计算如下:组织铁含量
(μmol/gprot)= 测定OD值-空白OD值 × 标准品浓度
(35.81μmol/L)÷ 待测样本蛋白浓度
(gprot/L)标准OD值-空白OD值 = 0.053-0.002 ×35.81÷1.6378=17.9855(μmol/gprot) 0.064-0.002
相关搜索:组织中的铁含量测定试剂盒(比色法),组织铁,tissue iron assay kit