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本试剂盒可检测各种动物血清（浆）、组织、细胞、培养液等样本中脂肪酶活性。

甘油三脂和水制成的乳胶，因其胶束对入射光的吸收及散射而具有乳浊性状。胶束中的甘油三脂在脂肪酶（Lipase；LPS）的作用下发生水解，使胶束分裂，散射光或浊度因而减低，减低的速率与脂肪酶活力有关。

可见光分光光度计、1cm光径比色皿、涡旋混匀器、37℃水浴锅、生理盐水、蛋白测定试剂。

• 胰腺中脂肪酶含量很高，测定之前需做预实验以确定最佳取样浓度（△A≤0.4）。
  
• 比色皿每次比色前要用温蒸馏水洗涤干净后再进行下次比色。
  
• 约有3～5%的分析标本与底物作用后吸光度反而增加，一般是反复冻溶的标本及IgM增高的样本（如类风湿因子）。
  
• 试剂一临用前37℃预温后使用。

• 血清(浆)样本：直接取样检测，若是有固体存在，可4000转/分，离心5分钟，取上清检测；
  
• 组织样本：准确称取待测组织，按重量(g)∶体积(mL)=1∶4的比例加入4倍体积的生理盐水，冰水浴条件机械匀浆，4000转/分，离心10分钟，取上清液（20%匀浆上清）待测（该上清需测其蛋白浓度，用于计算）。

• 按下表加入各成分，配制反应体系，各管单独操作。
  

  成分	标准管	血清(浆)测定管	组织匀浆测定管
  生理盐水	50μL	-	-
  血清(浆)	-	50μL	-
  组织匀浆	-	-	25μL
  试剂三	-	-	25μL
  试剂一	2mL

• 涡旋混匀，迅速倒入比色皿中，在分光光度计420nm处（1cm光径）比色，30秒时读取吸光度值A₁，37℃保温，10分30秒时再次读取吸光度值A₂，求△A_测定=A₁-A₂，标准管只需读A₁值即可。

• 将分光光度计于420nm处，1cm光径玻璃比色皿，用试剂二调零。
  
• 将试剂一37℃预温5分钟以上。
  
• 往相应编号的测定管中加入50μL血清（浆）（组织样本加匀浆25μL和试剂三25μL），吸取已预温好的试剂一2mL加入试管中，快速混匀并计时。
  
• 迅速倒入1cm光径比色皿中，在分光光度计420nm处比色，30秒时读取吸光度值A₁。
  
• 将此反应液倒入原试管中置37℃水浴锅中反应，10分种时从水浴锅中取出，倒入比色皿中，再迅速放入分光光度计，10分30秒时读取吸光度值A₂。
  
• 标准管先加入50μL生理盐水，再加入2mL试剂一，涡旋混匀，在分光光度计420nm处比色，记为A_s。
  
• 求出测定管2次吸光度差值（△A=A₁-A₂）。

• 标准管吸光度值A_S，相当于标准管(454μmol/L)的浓度的吸光度值。
  
• 血清（浆）样本：
  
  • 单位定义：在37℃条件下，每升血清(浆)在本反应体系中与底物反应1分钟，每消耗1μmol底物为一个酶活力单位。
    
  • 计算公式：
    

    血清(浆)LPS活力 (U/L)	＝	A1－A2	×C标准×	V反总	÷T×N
    		As		V样

• 组织样本：
  
  • 单位定义：在37℃条件下，每克组织蛋白在本反应体系中与底物反应1分钟，每消耗1μmol底物为一个酶活力单位。
    
  • 计算公式：
    

    组织LPS活力 (U/g蛋白)	＝	A1－A2	×C标准×	V反总	÷T×N÷Cpr
    		As		V样