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本试剂盒可测各种动物组织等样本中乙酰胆碱(Ach)含量。本试剂盒检测灵敏度高，与传统的Ach含量测定方法相比，此方法仅需微量样品即可测出乙酰胆碱的水平。而且，操作方法简便、快速，测定结果准确稳定。

乙酰胆碱与底物液反应，通过显色反应生成棕色化合物，测定其吸光度OD值，其颜色深浅与乙酰胆碱浓度成正比。

乙酰胆碱是研究最早的神经递质，是许多周围神经如运动神经、植物性神经系统节前纤维和副交感神经节后纤维的兴奋性神经递质。测定血中乙酰胆碱含量对判定植物神经功能及其在某些疾病如支气管哮喘、慢性支气管炎、湿疹、溃疡病等的发病中的作用具有一定意义。

试剂四低温会凝固，用前37℃水浴5分钟以上溶解完全，澄清透亮后使用。

酶标仪（550nm）、微量移液器、漩涡混匀器、低速离心机、37℃水浴/气浴箱。

• 试剂一工作液：临用前将一支甲粉加入到一瓶甲粉溶剂中配成甲液（4℃可保存1个月），按甲液∶乙液=1∶1的混合后配成试剂一工作液，按需要量配制。
  
• Ach标准品：临用前取0.25mL标准品稀释液加入到一支标准品粉剂中配成10mg/mL标准应用液，混匀溶解完全(制备标准曲线可用)。再取10mg/mL标准应用液100μL加900μL标准品稀释液，混匀后即为1mg/mL标准应用液，4℃保存不超过3天。

准确称量组织重，按重量(g)∶体积(mL)＝1∶9加试剂六进行组织匀浆（例如0.1g组织+0.9mL试剂六），2500～3500转/分钟，离心10分钟，取上清待测。

• 按下表依次加入各成分配制反应体系。
  

  成分(μL)	空白管	标准管	测定管	对照管
  双蒸水	50	40
  1mg/mL Ach标准品		10
  待测样本			25	25
  试剂一工作液	100	100	100
  混匀，室温静置15分钟。
  试剂二	50
  试剂三	50
  试剂一				100
  试剂四			25	25

• 混匀，静置10分钟，550nm处，取200μL于96孔板在550nm处酶标仪测定各孔OD值。