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哺乳动物羧酸酯酶（CarE）广泛分布于组织和器官中，大部分的羧酸酯酶属于丝氨酸水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性和外源性物质的水解，但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢，并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关，有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。

CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯，固蓝显色，在450nm检测光吸收速率来监测萘酯生成速率，从而计算CarE活性。

• 试剂三：临用前取1支试剂三加1.2mL无水乙醇充分溶解。
  
• 工作液：临用前取试剂二1瓶，取少量试剂二加入到1支试剂四中溶解，然后把溶解的1支试剂四和1支试剂三加入到该瓶试剂二中，混匀充分，过滤，4℃避光保存，可用1周。

• 细菌、细胞样品：
  
  • 收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；
    
  • 按照每200万细菌或细胞加入400μL试剂一；
    
  • 超声波破碎细菌或细胞（功率20%，超声3s，间隔10s，重复30次）；
    
  • 12000g在4℃离心30分钟，取上清液待测。
• 组织样品：
  • 按照组织质量(g)∶提取液体积(mL)＝1∶5～10的比例混合；
    • 建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。
  • 12000g，4℃离心30分钟，取上清液待测。
• 液体样品：直接取样。

• 分光光度计预热30min以上，调节波长到450nm，用蒸馏水调零。
  
• 工作液在37℃中预热30min以上。
  
• 空白管：依次在1mL玻璃比色皿中依次加入5μL蒸馏水，1000μL预热的工作液，迅速混匀后在450nm测定10s和190s光吸收A₁和A₂，△A_空白管=A₂-A₁。
  • 空白管只需做1～2次。
• 测定管：依次在1mL玻璃比色皿中依次加入5μL上清液，1000μL预热的工作液，迅速混匀后在450nm测定10s和190s光吸收A₃和A₄，△A_测定管=A₄-A₃。

• 组织中CarE活性
  
  • 按样本蛋白浓度计算
    单位定义：每毫克组织蛋白在37℃每分钟催化吸光值增加1，定义为1U。
    

    CarE活力 (U/mgprot)	＝	(ΔA测定－ΔA空白)×V反总	÷T
    		Cpr×V样
    	＝	67×(ΔA测定－ΔA空白)÷Cpr

    
    
  • 按样本质量计算
    单位定义：每克组织在37℃每分钟催化吸光值增加1，定义为1U。
    

    CarE活力 (U/g)	＝	(ΔA测定－ΔA空白)×V反总	÷T
    		W÷V样总×V样
    	＝	67×(ΔA测定－ΔA空白)÷W

• 细胞或细菌中CarE活性：
  单位定义：每1万个细胞或细菌在37℃每分钟催化吸光值增加1，定义为1U。
  

  CarE活力 (U/104 cells)	＝	(ΔA测定－ΔA空白)×V反总	÷T
  		细胞密度÷V样总×V样
  	＝	67×(ΔA测定－ΔA空白)÷细胞密度

  
  
• 液体样本中CarE活性：
  单位定义：每mL样本在37℃每分钟催化吸光值增加1，定义为1U。
  

  CarE活力 (U/mL)	＝	(ΔA测定－ΔA空白)×V反总	÷T
  		V样
  	＝	67×(ΔA测定－ΔA空白)

• V_样总：上清液总体积，1mL。
  
• V_样：加入上清体积，0.005mL。
  
• V_反总：反应体系总体（L），1.005mL；
  
• W：样本质量，（g）
  
• T：催化反应时间（min），3min。
  
• Cpr：上清液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定，建议使用本所BCA蛋白质含量测定试剂盒；
  
• 细胞密度：用10⁴ cells/mL表示。