产品货号：
KFS345
中文名称：
抑制与产生超氧阴离子自由基检测试剂盒(比色法)
英文名称：
产品规格：
50T
发货周期：
1～3天
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模拟机体中黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统，产生超氧阴离子自由基O2-，加入电子传递物质及gress氏显色剂，使反应体系呈现紫红色，可用分光光度计测其吸光度，当被测样本中含有O2-抑制剂时，则比色时测定管的吸光度低于对照管的吸光度，而如果被测样本中含有产生O2-物质时，则比色时测定管的吸光度高于对照管的吸光度，通过以维生素C做标准，可计算出被检物品对O2-的影响能力。
| 组分 | 规格 |
| Buffer A | 5mL |
| Buffer B | 5mL |
| Buffer C | 5mL |
| Buffer D | 350μL |
| Buffer D稀释液 | 5mL |
| 试剂E | 1支 |
| 试剂F | 1支 |
| VC标准品 | 4支 |
保存：2～8℃，有效期6个月。
- Buffer A室温较低时会有部分结晶析出，溶解后加蒸馏水稀释10倍至1×Buffer A50mL。
- Buffer D用前用Buffer D稀释液按1︰14稀释至1×Buffer D(不可冷冻，4℃可保存2个月)。
- 试剂E配制：将试剂加入蒸馏水37.5mL中溶解后备用，4℃避光保存。
- 试剂F配制：将试剂加入蒸馏水37.5mL中溶解后备用，4℃避光保存。
- 显色剂配制：试剂E︰试剂F︰冰乙酸＝3︰3︰2的体积比配制，4℃避光保存(冰乙酸自备)。
- VC标准贮备液配制：将一支VC标准品加蒸馏水定容至5mL(VC标准配制后当天内使用)
VC标准品工作液(0.15mg/mL)配制：取1mL贮备液加4mL蒸馏水，5倍稀释现配现用。
VC标准品配制后见光极易分解，配制的0.15mg/mL Vc标准品工作液需30分钟内检测。
- 按下表加入各成分：
注：因反应体系中在规定的底物浓度下，各种物质抗O2。能力不一样，根据朗伯—比尔定律，取样量不可太大也不可太小，否则影响结果。因此在正式实验前必须做预试验以确定最佳取样量。试剂 测定管 对照管 标准管 1×Buffer A(mL) 1.0 1.0 1.0 蒸馏水(mL) 0.05 0.15mg/mL Vc标准品(mL) 0.05 样品(ml) 0.05 Buffer B(mL) 0.1 0.1 0.1 Buffer C(mL) 0.1 0.1 0.1 1×Buffer D(mL) 0.1 0.1 0.1 - 用涡旋混匀器充分混匀，置37水浴40分钟。
- 向各反应管中加入2mL显色剂。
- 10min后倒入1cm光径比色杯中，蒸馏水调零，波长550nm处比色。
- 血清(浆)样本
- 单位定义：
在反应体系中，每升血清(浆)在37℃反应40分钟所抑制的超氧阴离子自由基相当于1mg的维生素C所抑制的超氧阴离子自由基的变化值为一个活力单位。 - 计算公式：
血清(浆)中抗超氧
阴离子活力单位(U/L)＝ 对照管吸光度－测定管吸光度 × 标准浓度
(0.15mg/mL)×1000mL× 样本测试前
稀释倍数对照管吸光度－标准管吸光度 - 计算举例：
取血清50μL进行抗超氧化阴离子检测，测得对照管OD值为0.570，测定管OD值为0.230，标准管OD值为0.256，标准管浓度为0.15mg/mL Vc标准品。则计算结果为：血清(浆)中抗超氧阴离子活力单位(U/L) ＝ 0.570－0.230 ×0.15×1000×1=162.42(U/L) 0.570－0.256
- 单位定义：
- 组织样本
- 单位定义：
在反应体系中，每克组织蛋白在37℃反应40分钟所抑制的超氧阴离子自由基相当于1mg的维生素C所抑制的超氧阴离子自由基的变化值为一个活力单位。 - 计算公式：
组织中抗超氧阴离子
活力单位(U/gprot)＝ 对照管吸光度－测定管吸光度 × 标准浓度
(0.15mg/mL)×1000mL÷ 蛋白含量
(gprot/L)对照管吸光度－标准管吸光度 - 计算举例：
取1%大鼠胃粘膜匀浆50μL进行抗超氧阴离子检测，测得对照管OD值为0.506，测定管OD值为0.267，标准管OD值为0.265，蛋白含量0.657mgprot/ml，标准管Vc标准品的浓度为0.15mg/mL。则计算结果为：组织中抗超氧阴离子活力单位(U/gprot) ＝ 0.506－0.267 ×0.15×1000÷0.657＝226.42(U/gprot) 0.506－0.265
- 单位定义：
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