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过氧化氢H2O2与钼酸作用生成一种络合物，在405nm处测定其生成量可计算出H2O2的量。

组份	50T
试剂A	60mL
试剂B	60mL
试剂C：H2O2标准品C	5mL
说明书	1份

2～8℃避光保存，有效期6个月。
注：
● 试剂拆封后请尽快使用完！
● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。


分光光度计（405nm），离心机，移液器，纯水，蛋白定量试剂盒


● 试剂B为过饱和溶液，如有结晶析出，可60℃水浴溶解后使用。
● 试剂A使用前需37℃预温10分钟。
● 样本取样量要做预试，吸光度大于0.8以上则需将样本进行稀释。若吸光度小于0.05以下，则需将取样量增加。（标准管中的标准品工作液及空白管中的蒸馏水均要同样量增加）


163mmol/L H2O2标准品工作液的配制：
用前按H2O2：纯水＝ 1：9比例稀释。充分混匀，即得标准品工作液。

样品处理：
A.血清（浆）中H2O2含量测定
直接取原液检测
B.组织中H2O2含量测定
准确称取组织重量，按重量(g):体积（ml）=1:9的比例，加入9倍体积的生理盐水，1g组织加入9mL生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，1000转/分，离心10分钟，取上清匀浆待测。

测定：
按下表添加试剂：

试剂（mL）	空白管	标准管	测定管
试剂A	1.0	1.0	1.0
蒸馏水	0.1
163mM H2O2标准品工作液		0.1
样本			0.1
用旋涡混匀器充分混匀，置37℃恒温水浴1分钟
试剂B	1	1	1
充分混匀，于波长405nm处，1cm光径比色杯，纯水调零，测各管吸光度。

注：
● 试剂A使用前需37℃预温10分钟。
计算：
血清（浆）中H2O2含量测定
H2O2含量（mmol/L）=（OD测定-OD空白）÷（OD标准-OD空白）×标准品浓度(163mmol/L)×样品稀释倍数
组织中H2O2含量测定
H2O2含量（mmol/gprot）=（OD测定-OD空白）÷（OD标准-OD空白）×标准品浓度(163mmol/L)×待测样本蛋白浓度（gprot/L）
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