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活性氧(Reactive oxygen species,ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
组织活性氧检测试剂盒是一种利用新型荧光探针O11进行组织活性氧检测的试剂盒。本试剂盒中的ROS探针为绿色荧光的活性氧探针，具有488/530nm的最大激发/发射波长。
O11 ROS探针在组织中活性氧存在的条件下，被氧化生成绿色荧光物质，绿色荧光强度与组织内活性氧水平成正比，检测O11产物的荧光就可以知道组织内活性氧的水平。
在激发波长488nm，发射波长525nm附近，使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、等检测O11产物荧光，从而测定组织内活性氧水平。
本试剂盒可以用于各种动物和植物样本的检测。不可以用于含有叶绿体的样本的活性氧检测。
本试剂盒只可以用于新鲜组织样本的活性氧检测，不可以用于冻存的组织样本的活性氧检测。
以每个组织样本50mg计，本试剂盒小包装可以染色100个样本。


● 使用方便：可用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测；
● 背景低，灵敏度高；
● 线性范围宽，使用方便。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
● 荧光分光光度计或荧光酶标仪，激发波长488nm，发射波长520±10nm，或者按照FITC荧光检测条件检测匀浆机/匀浆器。
● 离心机● 移液器● 匀浆机/匀浆器● PBS缓冲液/HBSS（不含酚红） ● 蛋白定量试剂盒

组份	100T	200T
组份A：匀浆缓冲液A	100mL	100mL×2
组份B：活性氧探针O11	100μL	100μL×2
说明书	1份	1份

匀浆液2～8℃保存；探针-20℃避光保存。有效期1年。
注：
● 染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
● 染色液O11为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
● 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。


● 螺旋盖微量管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
● O11染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
● 使用前先将本品取出回至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
● 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。


试剂准备：
根据样本数量，用纯水将O11探针10倍稀释。充分混匀，备用。
注：
● 不可以一次性将探针全部稀释。
● 现配现用。
样本处理：
1.刚取得的新鲜组织样本用PBS洗净。
2.准确称取50mg组织，加入500μL匀浆缓冲液A，用匀浆机/匀浆器尽可能充分快速匀浆。
3.在100×g，4℃离心5分钟，取上清备用。
样本检测：
1.在96孔板中加入190μL匀浆上清液、10μL O11探针，用移液器吹打，使之充分混匀。
2.在37℃避光孵育20～30分钟。
3.置于酶标仪中，后于激发波长为488nm、发射波长530nm检测荧光强度。
蛋白定量：
1.另取50μL上清匀浆液，用PBS大约稀释30倍。
2.取100μL进行蛋白定量。
结果处理：
以荧光强度/毫克蛋白表示组织活性氧强度
注：
● 数据与蛋白浓度的单位无关。
● 此处以蛋白浓度数据作为校正系数，对不同样品进行均一化。
相关搜索：组织活性氧(ROS)检测试剂盒(O11,绿色)