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本制品是百奥莱博公司开发的专门用于测定人体、动物的尿液尿素含量的试剂盒，也可用于测定血清、血浆等样品中尿素含量。

尿素酶水解尿素，产生氨和二氧化碳，铵离子与苯酚反应生成蓝色吲哚酚，吲哚酚的生成量与尿素含量呈正比，通过分光光度比色法(分光光度计)测定560nm处吸光度。

• 最好测定560nm处吸光度，如无560nm，也可测定630nm处吸光度。
  
• 如果没有分光光度计，也可以使用酶标仪测定，但应注意加入试剂量不同，相应的检测次数会大大增加。
  
• 采用分光光度计空白参考范围一般在0.05～0.1之间，5mmol/L标准参考范围一般在0.35～0.45之间，由于仪器设备、操作方法以及工作环境不同，参考范围会有差异，该值会有一定波动；保存半年以后其标准管吸光度一般在0.45～0.55之间。
  
• 该法的测定下限在0.2～0.5mmol/L之间，测定上限在15～20mmol/L之间；从肉眼观察，一般情况下浓度在2～5mmol/L即可显示处蓝色，浓度≤2mmol/L时即可显示淡蓝色，浓度≥10mmol/L时即可显示深蓝色，一般情况下接近上限比接近下限更准确。
  
• 避免使用铵盐抗凝剂，否则会使结果偏高。
  
• 高浓度氟化物可抑制尿素酶，引起结果假性偏低。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 本试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

• 准备样品：尿液样品最好处理后检测，方法如下：取0.6mL尿液样品，加入沸石0.3g，加入无氨蒸馏水至15mL，反复震荡数次，吸附尿液中的游离铵盐，静置后，吸取稀释尿液，所测结果乘以25，如果尿液比较少，可以等比例减少各试剂的使用量。血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存。
  
• 配制标准品工作液：取适量的尿素标准(100mmol/L)，按尿素标准(100mmol/L)∶ddH2O=1∶19的比例混合，使尿素浓度达到5mmol/L，即为标准品工作液-尿素标准(5mmol/L)；4℃保存，1周有效。
  
• 配制脲酶工作液：取适量的脲酶溶液，按脲酶溶液∶脲酶稀释液=1∶99的比例混合，即为脲酶工作液；4℃避光保存，1月有效。
  
• Urea加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的Urea浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
  

  加入物(mL)	空白管	标准管	测定管
  ddH2O	0.01	—	—
  尿素标准(5mmol/L)	—	0.01	—
  待测样品	—	—	0.01
  脲酶工作液	0.2	0.2	0.2
  充分混匀，37℃水浴。
  Urea显色液	1.0	1.0	1.0
  Urea Assay Buffer	1.0	1.0	1.0

• Urea测定：充分混匀，37℃水浴，分光光度计检测吸光度，比色杯光径1cm，空白管调零，读取各管吸光度，分别为A标准、A测定。
  
  • 采用分光光度计空白参考范围在0.05～0.1之间，5mmol/L标准参考范围在0.35～0.45之间，由于仪器设备、操作方法以及工作环境不同，参考范围会有差异。