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本制品是百奥莱博公司开发的，基于双环己酮草酰二腙法(又称Cuprizone法)，专门用于定量检测血清、血浆等样本中铜离子浓度的试剂盒。

在酸性介质中与白蛋白结合的铜从白蛋白中解离出来，经沉淀蛋白质后铜离子与Cuprizone络合，形成稳定的蓝色络合物，通过酶标仪测定620nm处吸光度，形成的蓝色与血清、血浆铜成线性关系，与标准品比较，根据公式计算出铜含量，该检测试剂盒在62.8μmol/L以下线性关系良好，特异性高，较为灵敏。

• 如果样品浓度过高，应用去离子水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
  
• 实验过程中用到的水，不可用普通的蒸馏水，尽量采用高纯度的去离子水。
  
• 玻璃器材尽量用10%的盐酸浸泡24h，取出后用去离子水冲洗后才可以使用。
  
• 试验中仪器、试管、注射器等尽量避免铜污染。
  
• 测定波长可选600～640nm，检测结果差异不大。
  
• 该试剂盒呈色稳定，显色后在4～20℃可稳定1h。
  
• 随着时间的延长，颜色会变浅或消失，应在1h内检测完毕。
  
• Cu Assay Buffer应密闭保存，用完立即盖紧盖子，防止有效成分挥发。
  
• 经典标准品采用铜标准(2μg/mL)，如仪器精密干扰小，可以采用铜标准(2μg/mL)，其计算公式为：
  
  血浆、血清铜(μmol/L)＝(A_测定/A_标准)×31.4
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
  
• 该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

• 制备样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于该试剂盒的测定，-20℃冻存，用于Cu的检测。
  
• 配制铜标准工作液：取适量的铜标准(100μg/mL)，按铜标准(100μg/mL)∶铜标准稀释液=1∶24的比例配制铜标准(4μg/mL)，即为铜标准工作液；4℃避光保存，3个月有效。
  
• Cu加样：最好选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥试管或者一次性无菌聚乙烯1.5mL离心管，以及洁净96孔板，如果无法达到上述要求，应尽量避免使用铜污染的器皿，按下表操作。
  

  加入物(μL)	空白管	标准管	测定管
  ddH2O	200	—	—
  铜标准(4μg/mL)	—	200	—
  待测样品	—	—	200
  Cu酸化液	140
  充分混匀，室温放置10min。
  蛋白沉淀液	200
  充分混匀，室温放置10min，3000g离心10min，吸取各管上清液，取96孔板按下列步骤操作。
  上述上清液	100
  Cu Assay Buffer	140
  Cuprizone显色液	10

  
  
• Cu测定：混匀，室温静置20min，以空白调零，酶标仪620nm处测定标准孔和测定孔的吸光度(即为A_标准和A_测定)。