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镁检测试剂盒(Calmagite微板法)可用于定量检测血清或血浆中的镁离子浓度。

利用溶液中镁离子在碱性条件下能与钙镁试剂结合，生成紫红色的复合物，颜色深浅与镁离子浓度呈正比，通过酶标仪检测510nm处吸光度，根据公式计算出镁含量，溶液中含有钙离子螯合剂EGTA可消除钙的干扰，使用表面活性剂可使蛋白胶体稳定，不必去除血清蛋白质而直接测定镁。

• 去离子水、稀氢氧化钾溶液或稀盐酸溶液
  
• 离心管或试管、离心机、96孔板、酶标仪

• 溶血样品对检测有干扰，尽量避免采用溶血样品。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
  
• 脂血样本对检测也有干扰，样本应去脂处理后再进检测。
  
• 在该试剂盒条件下，待测样品中镁离子浓度应大于0.05mmol/L、小于0.823mmol/L为宜，镁离子浓度高于0.6mmol/L以上建议用去离子稀释后再测定，否则有可能造成检测误差。
  
• 本法能够用于自动生化分析仪终点检测法。
  
• 如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
  
• 注意避免Mg²⁺的污染，以免影响检测结果。
  
• Mg显色工作液为浅蓝色，酶标仪测定510nm时，OD值为0.3～0.6为宜。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 本试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

• 制备样品：
  
  • 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于该试剂盒的测定，-20℃冻存，用于Mg的检测。
    
  • 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于Mg的检测。
    
  • 高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Mg，可以使用ddH2O稀释，不宜使用普通蒸馏水稀释。
    
  • 选做：样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的Mg含量。
• 配制Mg显色工作液：临用前，按Calmagite显色液∶Mg Assay Buffer∶Calmagite基液∶去离子水＝10∶10∶1∶80的比例混合，用1M氢氧化钾溶液调整pH值，即为Mg显色工作液；4℃避光保存，2周有效。
  
• Mg加样：选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的96孔板，按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡；如果样品中的镁离子含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置平行孔。
  

  加入物(μL)	空白孔	标准孔	测定孔
  ddH2O	3.5	—	—
  镁标准(0.823mmol/L)	—	3.5	—
  待测样品	—	—	3.5
  Mg显色工作液	280	280	280

• Mg测定：混匀，以空白孔调零，酶标仪测定标准孔、测定孔吸光度(记为A_标准、A_测定)。

• 血清、血浆中镁(mmol/L)＝(A_测定/A_标准)×0.823
  
• 组织中镁(mmol/mg)＝(A_测定/A_标准)×0.823/待测样品蛋白浓度(mg/L)