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本试剂盒多用于血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定，该法操作简单、方法特异，既可手工操作，又可采用自动分析仪检测。

在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚绿(BCG)结合生成蓝绿色复合物，在628nm处有吸收波，该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，求得待测样品中白蛋白浓度。

• 白蛋白标准粉末溶解于白蛋白标准配制液后，即获得白蛋白标准原液，该原液中含有防腐剂，不影响后续检测，该蛋白标准原液-20℃长期保存。
  
• 如果没有酶标仪，也可以使用分光光度计测定，使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
  
• 本法线性范围是10～60g/L。
  
• 该法测定正常样本的批间变异系数为6.3%。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
  
• 本试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

• 取0.5mL白蛋白标准配制液或稀释液加入到白蛋白标准(20mg)，充分溶解后配制成40mg/mL白蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的白蛋白标准溶液应-20℃保存。
  
  • 待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，白蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中，例如待测蛋白溶解于蔗糖，亦取白蛋白标准溶解于蔗糖，一般也可以用0.9% NaCl或PBS作为溶解白蛋白标准品的稀释液。
• 样本处理：血清、血浆样本直接取5μL检测，对于组织样本，按组织质量(g)∶生理盐水(ml)=1∶9比例，加入9倍体积的生理盐水或PBS，冰浴下匀浆后，2500g离心10min，取5μL上清待检。
  
• 白蛋白加样：按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置平行孔。
  

  加入物(μL)	空白孔	标准孔	测定孔
  白蛋白标准配制液	5	-	-
  白蛋白标准溶液(40mg/mL)	-	5	-
  待检样品(血清、血浆、组织匀浆液)	-	-	5
  BCG试剂	250	250	250

• 白蛋白测定：先以空白孔调零，顺序加入BCG试剂，并立即混匀，室温放置(30±3)s，在酶标仪628nm处读取标准孔和各测定孔的吸光度(即为A _标准、A _测定)。
  
• （备选步骤）当遇到脂血混浊，可设“样本空白孔”：取5μL待测样品加入250μL BCG空白试剂即为“样本空白孔”，以BCG空白试剂调零，读取“样本空白孔”的吸光度，用测定孔的吸光度减去“样本空白孔”的吸光度后的净吸光度，计算白蛋白浓度。