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本试剂盒主要用于检测动物血液的红细胞孵育渗透脆性，并计算红细胞中性脆性(MCF)。

将血液样本置于37℃孵育24h，使红细胞代谢继续进行，由于葡萄糖的消耗，储备的ATP减少，导致需要能量的红细胞膜对阳离子的主动传递受阻，造成钠离子在红细胞内聚集，细胞膨胀，孵育渗透脆性增加，某些有细胞膜缺陷以及某些酶缺陷的红细胞的葡萄糖和ATP很快被耗尽时，孵育渗透脆性明显增加，该实验被称为红细胞孵育渗透脆性试验。

• 每次检查应设正常对照。
  
• NaCl Phosphate Buffer pH值及温度必须恒定，pH改变0.1或温度改变5%，均可使结果偏差0.01%。
  
• NaCl Phosphate Buffer采用高纯度氯化钠配制，普通氯化钠不宜采用。
  
• NaCl Phosphate Buffer不要被酸碱污染，同时注意密闭保存。
  
• 血液样品应直接滴入液体，不宜沿管壁流入。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
  
• 本试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

• 取肝素抗凝血2mL，分成2份，1份立即实验，另1份密闭37℃孵育24h后再作实验。
  
• 取小试管或恰当容器，依次编号，按照下表稀释成不同浓度。每次检查应设正常对照。
  

  试管号	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13
  NaCl Phosphate Buffer(mL)	3.4	3.0	2.8	2.6	2.4	2.2	2.0	1.8	1.6	1.4	1.2	0.8	0.4
  ddH2O(mL)	0.6	1	1.2	1.4	1.6	1.8	2.0	2.2	2.4	2.6	2.8	3.2	3.6
  NaCl(g/L)	8.5	7.5	7.0	6.5	6.0	5.5	5.0	4.5	4.0	3.5	3.0	2.0	1.0

• 分别吸取40μL肝素抗凝血加入上述NaCl稀释液中，轻轻混匀，室温(20℃)静置30min。
  
• 将各管再次混匀1次，离心沉淀5min，取上清液。
  
• 用分光光度计检测540nm波长，以NaCl Phosphate Buffer作为空白管调零，测定各溶血管的吸光度。
  
• 计算溶血百分率：以1g/L NaCl完全溶血管的吸光度为100%，计算相应氯化钠浓度的溶血百分率。
  溶血百分率(%)＝各管吸光值/100%溶血管吸光值×100。
  
• 计算红细胞中性脆性(MCF)：以溶血百分率为纵坐标，以氯化钠浓度为横坐标，作溶血曲线图，即为红细胞盐水渗透脆性曲线。在曲线上，50%溶血的氯化钠浓度为红细胞中性脆性(MCF)。