产品货号:
SYA002
中文名称:
沙门氏菌单重荧光PCR检测试剂盒
英文名称:
Salmonella PCR Detection Kit
产品规格:
48次/盒
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒是百奥莱博公司基于荧光PCR技术开发的,专门用于增菌培养物、疑似病料及食品等样本中沙门氏菌的定性研究检测,其结果仅供参考。

| 组分 | 规格 |
| 沙门氏菌反应液 | 720μL |
| 核酸提取液 | 1.5mL×2 |
| 阳性对照(Sal-PTC) | 50μL |
| 阴性对照(NTC) | 50μL |
保存:-20℃,有效期1年。

- 试剂盒应在-20℃以下保存和运输。
- 本试剂盒仅限体外研究检测使用,操作人员需经过相关实验的专业培训,并在使用前认真阅读说明书全文。
- 不要使用过期的试剂盒或者不同批次试剂盒的组分混匀。
- 使用时尽量避免反复冻融,冻融不应超过5次,否则建议分装后使用。
- 样本采集和处理过程应遵循生物安全管理要求。
- 荧光PCR实验严格分区操作,各区应有专用的手套、移液器等,不得交叉使用,避免污染;工作人员应遵循单方向工作原则,各工作区相对隔离。
- 测试样本时,应做好生物安全防护。
- 实验完毕后,使用的试剂盒、样本和试剂应进行无害化处理。

- 食品样品:样品的采集与预培养参照相应标准要求进行。
- 粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
- 病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
- 上述样品建议经过增菌后,收集培养物用于检测。

可采用试剂盒配备的核酸提取液,按以下说明进行核酸的快速提取:对上述固体样本取黄豆粒大小加入50μL核酸提取液;液体样本取50μL加入50μL核酸提取液;100℃恒温处理5min。13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL离心管中,-20℃保存。

从试剂盒中取出沙门氏菌反应液,完全复融并震荡混匀后,瞬时离心。设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),配制加样见下表,瞬时离心后尽快扩增检测。
| 成分 | 用量 |
| 沙门氏菌反应液 | 15μL×N |
| 样本核酸/阳性对照/阴性对照 | 5μL×N |
| 总量 | 20μL×N |

| 过程 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 产物消化 | 50℃ | 2min | 1 |
| 预变性 | 95℃ | 3min | 1 |
| PCR扩增 | 95℃ | 15sec | 40 |
| 60℃ | 30sec |
- 使用ABI品牌仪器时,需将淬灭基团改为NONE,请勿选择ROX参比荧光。

- 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线;
- 阳性对照(Sal-PTC):均产生扩增曲线;
- 以上条件应同时满足,否则,此次实验视为无效。

| Ct≤35 | 无Ct值 | 35<Ct≤40且有明显扩增曲线 | |
| FAM | 阳性+ | 阴性- | 可以样本 |
- 对于可疑样本,重新提取核酸,再次进行对应的PCR检测。如果重复结果Ct值≤40且出现对数扩增曲线判为样本阳性;否则判为样本阴性。
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