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本产品是一种经典而又快速简便的细胞凋亡与细胞坏死检测试剂盒，采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)双染的方法。细胞发生凋亡时，染色质会固缩。Hoechst 33342可以穿透细胞膜，染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。碘化丙啶(PI)不能穿透细胞膜，对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞，其细胞膜的完整性丧失，碘化丙啶(PI)可以染色坏死细胞。上述两种染料双染后，使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时，正常细胞为弱红色荧光＋弱蓝色荧光，凋亡细胞为弱红色荧光＋强蓝色荧光，坏死细胞为强红色荧光＋强蓝色荧光。参考下图，左图为诱导凋亡前的正常细胞，右图为诱导凋亡后的细胞。

本试剂盒染色快速方便，两种染料的染色仅需20～30分钟，一步染色即可完成。使用方便，使用流式细胞仪检测时，无需稀释等配制过程，也无需再准备其它任何溶液。

• 需使用流式细胞仪进行红色和蓝色双荧光检测。也可使用荧光显微镜检测。
  
• 染色后宜尽快检测。
  
• Hoechst 33342对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。碘化丙啶(PI)对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护以避免直接接触人体或吸入体内。
  
• 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 每个样品收集约10～100万细胞于1.5mL离心管内，离心弃上清。细胞沉淀用0.8～1mL细胞染色缓冲液重悬。
  
• 加入5μL Hoechst染色液。
  
• 加入5μL PI染色液。
  
• 混匀，冰浴或4℃孵育20～30分钟。
  
• 用流式细胞仪检测红色荧光和蓝色荧光。
  
• 如果使用荧光显微镜检测，检测前离心沉淀细胞，用PBS洗涤一次，再涂片观察红色荧光和蓝色荧光。对于贴壁细胞使用荧光显微镜检测，可以不收集细胞，直接依次按照上述比例加入细胞染色缓冲液、Hoechst染色液和PI染色液冰浴或4℃染色20～30分钟。染色后PBS洗涤一次，再在荧光显微镜下观察。