产品货号：
HR0486
中文名称：
WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
英文名称：
产品规格：
250T|500T|1000T
发货周期：
1～3天
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WST-1 是广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂。WST-1 是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。WST-1是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其它MTT 类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。
首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan 不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-1和XTT、MTS产生的formazan 都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-1产生的formazan 比XTT和MTS产生的formazan 更易溶解。再次，WST-1比XTT和MTS 更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-1和MTT、XTT等相比，线性范围更宽，灵敏度更高。可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测等。WST-1 使用时无须同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外步骤去溶解formazan。WST-1对细胞无明显毒性。加入WST-1 显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到最佳测定时间。
储存条件：2-8℃避光保存。
注意：
1．WST-1短期存放于2-8℃，长期存放请分装后-20℃避光保存。
2．避免反复冻融。
3．冻存后溶解时注意重新混匀。
有效期：一年。
注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品特点：
● 使用方便：仅使用单一试剂；
● 结果稳定：试剂本身稳定性高，实验结果稳定可靠；
●线性范围更宽，灵敏度更高。
试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● 纯水 ● 移液器及吸头
● CO2培养箱 ● 带有450nm滤光片的酶标仪
使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发，为了减少误差，建议培养板的四边每孔只加培养基，而不作为指标检测孔。
●有条件的情况下建议采用多通道移液器，可以减少平行孔间的差异。
● 若细胞培养时间较长，培养基颜色发生变化或pH 发生变化，建议更换新鲜的培养基后再加WST-1试剂。含有酚红的培养基可用于本试剂盒做细胞活性的测定。
● 如果不是使用96孔板检测，WST-1溶液的用量相应等比例增加即可。
使用方法：
1．加细胞悬液100μl(约5000-10000个细胞)到96孔板(边缘孔用无菌水或PBS填充)。每板设对照(加100μl培养基)。
2．置37℃，5% CO2 孵育过夜，倒置显微镜下观察。
3．每孔加入10 μl待检测药物溶液,37℃孵育。
4．每孔加入10 μl WST-1溶液，37℃孵育1-4小时。
5．测定450 nm 各孔的吸光值，如无450nm滤光片，可以使用430-480nm的滤光片。
5．同时设置空白孔(培养基和WST-1溶液，无细胞)，对照孔(不加药培养基和WST-1溶液，有细胞)，每组设定3-5 复孔。
常见问题：
1．每孔接种细胞数量多少？
标准96孔板时，贴壁细胞的最小接种量为1,000个/孔 (100 μl培养基)。预先在1,000-100,000个/孔范围内摸索条件。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入试剂。
2．酚红和血清影响实验结果吗？
酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。
3．测定时间为多少合适？
试剂对于不同的细胞灵敏度是不同的。因此不同细胞的最佳测定时间不一样，一般贴壁细胞0.5-3小时，悬浮细胞2-4小时，部分细胞时间更长。
4．实验中吸光值太高怎么处理？
在实验中如果吸光值太高，可以减少细胞数量和缩短加入试剂后的培养时间。贴壁细胞染色比较容易，细胞数量过大，有时吸光度会超过酶标仪的读数。
5．需要设定参比波长吗？
不一定需要设定。为了查出样品浑浊等原因导致的本底吸收，可以设定600nm以上的参比波长做双波长测定，此时试剂无吸收。
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首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan 不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-1和XTT、MTS产生的formazan 都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-1产生的formazan 比XTT和MTS产生的formazan 更易溶解。再次，WST-1比XTT和MTS 更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-1和MTT、XTT等相比，线性范围更宽，灵敏度更高。可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测等。WST-1 使用时无须同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外步骤去溶解formazan。WST-1对细胞无明显毒性。加入WST-1 显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到最佳测定时间。
储存条件：2-8℃避光保存。
注意：
1．WST-1短期存放于2-8℃，长期存放请分装后-20℃避光保存。
2．避免反复冻融。
3．冻存后溶解时注意重新混匀。
有效期：一年。
注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品特点：
● 使用方便：仅使用单一试剂；
● 结果稳定：试剂本身稳定性高，实验结果稳定可靠；
●线性范围更宽，灵敏度更高。
试剂盒以外自备试剂和仪器：
● PBS ● 纯水 ● 移液器及吸头
● CO2培养箱 ● 带有450nm滤光片的酶标仪
使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下来，导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发，为了减少误差，建议培养板的四边每孔只加培养基，而不作为指标检测孔。
●有条件的情况下建议采用多通道移液器，可以减少平行孔间的差异。
● 若细胞培养时间较长，培养基颜色发生变化或pH 发生变化，建议更换新鲜的培养基后再加WST-1试剂。含有酚红的培养基可用于本试剂盒做细胞活性的测定。
● 如果不是使用96孔板检测，WST-1溶液的用量相应等比例增加即可。
使用方法：
1．加细胞悬液100μl(约5000-10000个细胞)到96孔板(边缘孔用无菌水或PBS填充)。每板设对照(加100μl培养基)。
2．置37℃，5% CO2 孵育过夜，倒置显微镜下观察。
3．每孔加入10 μl待检测药物溶液,37℃孵育。
4．每孔加入10 μl WST-1溶液，37℃孵育1-4小时。
5．测定450 nm 各孔的吸光值，如无450nm滤光片，可以使用430-480nm的滤光片。
5．同时设置空白孔(培养基和WST-1溶液，无细胞)，对照孔(不加药培养基和WST-1溶液，有细胞)，每组设定3-5 复孔。
常见问题：
1．每孔接种细胞数量多少？
标准96孔板时，贴壁细胞的最小接种量为1,000个/孔 (100 μl培养基)。预先在1,000-100,000个/孔范围内摸索条件。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入试剂。
2．酚红和血清影响实验结果吗？
酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。
3．测定时间为多少合适？
试剂对于不同的细胞灵敏度是不同的。因此不同细胞的最佳测定时间不一样，一般贴壁细胞0.5-3小时，悬浮细胞2-4小时，部分细胞时间更长。
4．实验中吸光值太高怎么处理？
在实验中如果吸光值太高，可以减少细胞数量和缩短加入试剂后的培养时间。贴壁细胞染色比较容易，细胞数量过大，有时吸光度会超过酶标仪的读数。
5．需要设定参比波长吗？
不一定需要设定。为了查出样品浑浊等原因导致的本底吸收，可以设定600nm以上的参比波长做双波长测定，此时试剂无吸收。
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