产品货号：
GS0216
中文名称：
Annexin V凋亡检测试剂盒(FITC/PI双染法)
英文名称：
产品规格：
20T|100T|500T
发货周期：
1～3天
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Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷酯结合蛋白，参与细胞内的信号转导。Annexin V选择性结合磷酯酰丝氨酸(phosphatidylserine，简称PS)。磷酯酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷酯酰丝氨酸外翻到细胞表面，即细胞膜外侧。磷酯酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷酯酰丝氨酸结合后可以阻断磷酯酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。用带有绿色荧光的荧光探针FITC标记的Annexin V，即AnnexinV-FITC，就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷酯酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。本试剂盒还提供了碘化丙啶染色液，碘化丙啶（Propidium Iodide,PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。
| 组分 | 20T | 100T | 500T |
| 组分A:Annexin V-FITC | 100μL | 500μL | 2.5mL |
| 组分B:4X Binding Buffer | 2×1.5mL | 15mL | 75mL |
| 组分C:Propidium Iodide | 200μL | 1000μL | 5mL |
保存：2～8℃，避光，有效期1年。
使用前该试剂盒需要在室温解冻。
- 各试剂打开之前先离心，收集管壁及管口液体，避免损失。
- 用蒸馏水将4X Binding Buffer稀释成1X Binding Buffer。
- PBS温和洗涤收集的细胞，轻轻摇匀。
- 用195μL的1X Binding Buffer重悬细胞；使细胞密度为2～5×105 cells/ml。
- 加入5μL的Annexin V-FITC至195μL细胞重悬液，避光，混匀，室温孵育10～15分钟。
- 200μL 1X Binding Buffer洗涤细胞。
- 1000rpm，离心细胞2～5分钟，弃上清液。
- 将细胞重悬于190μL的1X Binding Buffer。
- 加入10μL Propidium lodide；
- 为防止荧光衰变，宜在4小时内进行流式检测。
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