产品货号:
MT0042
中文名称:
RNA极速提取试剂盒
英文名称:
RNA Ultra-Fast Extraction Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从细胞、动物组织、植物组织、病毒液样本、抗凝全血、培养细菌中纯化出高纯度的总RNA。本试剂盒操作步骤最少,最短5分钟即可完成RNA提取。应用本试剂盒提取的RNA可直接用于反转录、基因克隆、定量检测、文库构建、杂交等多种分子生物学实验。
- 用时最短:极强的裂解能力使得样品瞬间裂解,组织细胞样品可在5分钟内完成总RNA的提取。
- 超高纯度:该试剂盒采用柱式纯化,获取的RNA A260/A280为2.0~2.2,A260/A230为1.9~2.1。
- 高质量RNA:使用该试剂盒获取的RNA完整性良好。
- 使用安全:无需酚/氯仿抽提,减少了有毒有害物质。
- 操作简便:只需将样品与裂解液A和B混合,经一步挂柱和洗脱即可获得高质量总RNA。
组分 | 规格 |
RNA LB1 | 15mL |
RNA BB2 | 40mL |
Washing Buffer | 55mL |
Nuclease-Free H2O | 10mL |
吸附柱 | 50套 |
1.5mL Nuclease-Free收集管 | 50个 |
保存:室温,有效期1年。
- 本试剂盒中的Washing Buffer中已经加乙醇,无需单独添加。
- RNA LB1和RNA BB2均具有腐蚀性,注意防护。
RNA极速提取流程图:
样本使用量及RNA产量:
样本类型 | 样本量 | RNA产量 | |
培养细胞 | 100~107个 | 0.1~30μg | |
动物组织 | 肝脏 | 10~40mg | 10~30μg |
心脏 | 10~40mg | 5~10μg | |
脑 | 10~40mg | 5~10μg | |
肌肉 | 10~40mg | 2~10μg | |
植物组织(叶片、茎等) | 40~100mg | 5~30μg | |
病毒液/体液/血清/血浆 | 150μL | 0.5~5μg | |
培养细菌* | 106~109个 | 0.5~15μg |
- 注*:以大肠杆菌为例,1×109/ml细菌的OD600≈1。
图2.应用RNA极速提取试剂盒分别提取的Hela细胞(a)、人心肌组织(b)、新鲜杨树叶的总RNA(c)。
一、裂解/上柱(1.5mL EP管中处理)
- 培养细胞:胰酶消化完毕后,离心收集细胞沉淀,用20~30μL水或PBS重悬细胞沉淀(务必重悬充分)。加入120μL RNA LB1漩涡混匀30s(有未溶解的细胞团块,用枪头吹打,助溶解),加入500μlRNA BB2上下颠倒混合均匀,倒入吸附柱中。13000rpm离心30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
- 组织样品(采用研钵进行研磨):用液氮研磨粉碎组织样本,将研磨粉碎的样品加入到200μL RNA LB1中,漩涡混合均匀1min(有块状组织未溶解的,要使用枪头吹打,助消化),加入500μL RNA BB2上下颠倒混合均匀,13000rpm离心15s。将上清倒入吸附柱中(动作需轻柔,勿将未消化的组织块倒入吸附柱),13000rpm离心30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
- 组织样品(采用钢珠进行研磨):将组织样品加入到300μL RNA LB1中(1.5mL EP管),并加入几粒钢珠,置于组织研磨仪中,研磨1~2min。向研磨后的匀浆液中加入750μL RNA BB2,漩涡混匀5s,13000rpm离心1min。用1mL吸头吸取750μL上清液到吸附柱中。13000rpm离心30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
- 植物组织的匀浆效果通常较动物组织差一些,所以一般推荐采用液氮条件下研钵来研磨。在采用钢珠研磨的条件下务必将组织研磨粉碎,否则会导致产率降低。
- 病毒液/体液/血清/血浆:吸取150μL病毒液/体液样品到加入到120μL RNA LB1中,漩涡混合均匀30s。直接加入500μL RNA BB2中,漩涡混合均匀15s。倒入吸附柱中,13000rpm离心30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
- 培养细菌:收集菌体后,用20~30μL水重悬菌体(务必重悬充分),加入120μL RNA LB1漩涡混匀30s,加入500μL RNA BB2上下颠倒混合均匀,倒入吸附柱中。13000rpm离心30s,倒掉废液,进行后续洗涤/洗脱步骤。
二、洗涤和洗脱
- 向吸附柱中加入500μL Washing Buffer,13000rpm离心15s。
- 重复步骤1一次。
- 将吸附柱重新放回离心机,13000rpm空离心1min,将残留的乙醇彻底甩干。
- 将吸附柱芯放入到2mL Nuclease-Free收集管中,向吸附柱芯中加入20~50μL Nuclease-Free H2O。
- 室温放置1min,13000rpm离心1min,洗脱液即为提取的RNA,冷冻保存。
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