柱式骨骼DNA提取试剂盒

产品货号：

BTN91102

中文名称：

柱式骨骼DNA提取试剂盒

英文名称：

Bone DNA column extraction kit

产品规格：

50次

发货周期：

1～3天

产品价格：

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本制品是专门用于从各种动物骨骼（包括骨粉）样品中提取DNA的试剂盒。

产品特点：

微量提取，一次可以处理300mg左右的骨骼（但需要先将骨粉变成骨粉）。
柱式操作，方法简单，整个过程只需要40～60分钟。
得到的DNA分子量不均匀，一般在20 Kb到100bp之间，具体取决于骨骼的新鲜程度，骨粉的加工方法等。
得到的DNA可以直接用于PCR或荧光PCR反应。

产品组成：

成分	规格
骨骼DNA纯化溶液A	50mL
骨骼DNA纯化溶液B	25mL
骨骼DNA纯化溶液C	30mL
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50mL
DNA洗脱液（基因组DNA专用）	10mL

保存：4℃，有效期一年。

使用方法：

骨粉的制备：用自备酒精将骨骼表面擦洗干净，以防污染的现场DNA对后续PCR的影响，然后用骨钻在处理干净的骨骼区域钻取骨粉。对于已经制备好的、商品化的骨粉，可以跳过此步，直接进入下一步。
用天平称取0.2克骨粉，转移到2mL塑料离心管中。
加入1mL骨骼DNA纯化溶液A到骨粉中，充分振荡30秒混匀。
注意：骨骼DNA纯化溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用，且骨粉加到骨骼DNA纯化溶液A中后会特别黏稠，需使劲振荡混匀。
65℃水浴放置30分钟。
加入0.5mL的骨骼DNA纯化溶液B，充分振荡30秒混匀。
12000rpm室温离心3分钟，小心将上清液转移到一个新的塑料离心管中。
加入0.5mL骨骼DNA纯化溶液C，颠倒混匀。
将混合液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后需要12000rpm室温离心1分钟，并弃收集管中的穿透液。
加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
再加入0.5mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
12000rpm室温离心半分钟，弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要，否则残留的液体会抑制后续的PCR。
将离心吸附柱套入到一个自备的干净的1.5mL塑料离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入30μL DNA洗脱液（基因组DNA专用），然后室温放置2分钟。如果先将DNA洗脱液预热到60～80℃再使用，效果更佳。
12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的样品即为骨骼DNA。
取少量进行电泳检测。注意：一般DNA都呈现弥散状，分布在20 Kb到100bp这一广泛的范围，其比例跟骨骼（或骨粉）的新鲜程度、加工过程（对骨粉）等因素密切相关。
DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。

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